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大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa試劑盒使用說明書
更新時間:2017-04-26   點擊次數(shù):1012次

大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa試劑盒基本信息簡介

1(HO-1)是血紅素降解的限速酶,將血紅素轉(zhuǎn)變?yōu)槟懢G素IX,CO和鐵,膽綠素隨即被還原為膽紅素。已知HO有3種同工酶,HO - 1,HO - 2,HO - 3.HO - 2和HO - 3呈組成型大量表達,它們可能作為正常細胞內(nèi)的血紅素結(jié)合分別而發(fā)揮其功能。而HO - 1屬誘導(dǎo)型,HO - 1廣泛分布于哺乳動物多種組織細胞中;HO - 1可由多種刺激因子誘導(dǎo)表達,如氧化應(yīng)激、熱休克、紫外線照射、缺血再灌注、重金屬、細菌脂多糖、細胞因子和NO以及其底物血紅素。zui近的研究重點已集中在此酶促反應(yīng)產(chǎn)物的生物學(xué)效應(yīng)上,它們具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、信號傳導(dǎo)和免疫調(diào)節(jié)以及抑制黏附分子表達活性等作用。HO - 1對各種刺激因子的強大的適應(yīng)性反應(yīng)揭示,可能在阻止炎癥過程和氧化性組織損傷中具有重要的作用。

已有研究報道,HMOX2基因與藏族人的高原適應(yīng)有密切關(guān)系。藏族人較低的血紅蛋白濃度被認為是適應(yīng)高原的特征之一,而HMOX2基因直接調(diào)控著血紅蛋白分子中亞鐵血紅素的分解代謝,這個過程可能是造成血紅蛋白濃度偏低的重要原因之一。

大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa試劑盒使用注意事項簡介

收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮荆堅炷H〔暮螅瑢吮炯皶r分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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