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【測(cè)定原理】

應(yīng)用均相競(jìng)爭(zhēng)原理，標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的FSH和加入的¹²⁵I-FSH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)。¹²⁵I-FSH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中FSH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離試劑（PR）將結(jié)合部分（B）與游離部分（F）分離后，測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度，并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B₀。用已知FSH標(biāo)準(zhǔn)含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖，即得標(biāo)準(zhǔn)曲線。從標(biāo)準(zhǔn)抑制曲線上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中FSH的含量。

試劑配制、使用方法和保存

• FSH標(biāo)準(zhǔn)品：液體，直接使用，標(biāo)準(zhǔn)濃度分別為0、2.5、5、10、25、50、100mIU/ml。標(biāo)準(zhǔn)2~8℃保存，42天內(nèi)穩(wěn)定；未開(kāi)蓋的標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存，標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• ¹²⁵I-FSH：凍干品，用蒸餾水溶解，100管10ml溶解，50管5ml溶解。如一次加樣超過(guò)100管，兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi)，2~8℃保存，標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 兔抗-FSH抗體：凍干品，用蒸餾水溶解，溶解方法見(jiàn)封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過(guò)100管時(shí)，兩瓶溶解后混合使用。抗體溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 驢抗兔免疫分離劑：液體，直接使用，但加樣前必須搖勻！2~8℃保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后zui多穩(wěn)定45天。若加樣超過(guò)100管，兩瓶混合后搖勻。
• FSH質(zhì)控血清：使用方法，保存條件，有效期及附值，詳見(jiàn)質(zhì)控血清使用說(shuō)明書。

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數(shù)據(jù)處理

• 聯(lián)機(jī)處理: 由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
• 手工作圖或計(jì)算器處理:
  • 百分結(jié)合率計(jì)算：設(shè)S₀管計(jì)數(shù)為B₀，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B，非特異管計(jì)數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計(jì)算公式為

B/ B₀=(B－NSB)/( B₀－NSB)×

3.2.2 logit計(jì)算：各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為

logit=ln[(B/ B₀)/(1－B/ B₀)]

3.2.3 手工作圖：以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的B/B₀為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線（理想化時(shí)是一條直線）。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B₀可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標(biāo)紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是zui后的濃度值。

3.2.4計(jì)算器處理：使用有線性擬合功能的計(jì)算器，可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值，具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書。

3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例（僅供參考，不得用于實(shí)際計(jì)算）。濃度單位mIU/ml

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