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超氧陰離子清除能力試劑盒規范操作很重要
更新時間:2020-02-19   點擊次數:1236次

超氧陰離子清除能力試劑盒規范操作很重要

 

超氧自由基,亦稱過氧自由基, superoxide radical, .O2-。人體內產生的一種活性氧自由基,能引發體內脂質過氧化,加快從皮膚到內部器官整個肌體的衰老過程,并可誘發皮膚病變、心血管疾病、癌癥等, 嚴重危害人體健康,人體通過超氧化物歧化酶(SOD)將其轉化成過氧化氫和氧氣除去。

 

產品說明:

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm 的吸光值呈負相關。

 

操作步驟: 一、樣品處理
1. 組織:按照質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)
加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
2. 細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入
1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,
10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
3. 培養液或其它液體:直接檢測。
4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/mL。

 

所謂自由基,是指帶有不配對的電子的分子基因。自由基的種類很多,用來說明衰老發生機制的自由基,主要是超氧自由基、羥自由基和類脂質過氧化自由基。其中,超氧自由基作用的產物,都是強氧化劑,可使類脂質中的不飽和脂肪酸氧化為類脂過氧化物。它們都是引發脂質過氧化自由基反應的氧化劑,在正常情況下,由于生物體內存在自由基清除劑,如性激素、SOD、過氧化氫酶等使生物體內自由基的產生與清除保持相對平衡,并參與許多正常的生理生化反應。若自由基清除劑的合成惡性化或自由基反應發生紊亂,則會導致機體一系列的病理改變。

 

超氧陰離子清除能力試劑盒規范操作很重要

 

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