脂質體基因轉染試劑(可取代Lipo2000)
更新時間：2024-07-01 點擊次數：356次
脂質體基因轉染試劑(可取代Lipo2000)
產品描述
脂質體基因轉染試劑是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑，可替代Lipo2000，且與Lipo2000比其毒性更低，轉染效率更高。
本產品適合于將核酸（DNA和RNA）轉染入真核細胞，具有低細胞毒性；對多種類型的細胞和培養板都具有高轉染效率；轉染時血清的存在不影響轉染效率的優點。
本產品適用范圍：貼壁細胞和懸浮細胞（哺乳動物細胞系）的轉染。
產品優勢
1. 脂質體基因轉染試劑轉染效率高，可替代Lipo2000，重復性好，操作簡單。
2. 無明顯細胞毒性，抗血清干擾，用脂質體基因轉染試劑轉染細胞后，對于大多數細胞，72小時內不更換培養液無明顯細胞毒性。使用脂質體基因轉染試劑血清的存在不影響轉染效率，這樣可以減少去除血清對細胞的損傷。
3.脂質體基因轉染試劑適用范圍廣，適用于核酸（DNA和RNA）在多種類型細胞和培養器皿上的轉染。
實驗數據
為了更明顯看出轉染效率的差異，選擇DNA:轉染試劑相對較少的極限情況，分別用脂質體基因轉染試劑與進口T公司Lipo2000在293（常用的轉染細胞）和786-0（細胞狀態相對較差）兩種細胞上轉染pLJM1-EGFP質粒，24h或48h后用熒光顯微鏡觀察綠色熒光表達情況，判斷轉染效率。
結論：
1.脂質體基因轉染試劑在這兩種細胞上，表達綠色熒光蛋白的細胞比例均比進口T公司Lipo2000高，說明其轉染效率稍好于進口T公司Lipo2000。
2.轉染后6小時不換液（即不去除轉染試劑）與換液（即去除轉染試劑）相比，表達熒光蛋白細胞的數量并沒有減少，轉染效率并沒有降低，且不換液時與進口T公司Lipo2000相比，脂質體基因轉染試劑蛋白表達量更高，說明其細胞毒性更低。
3.在細胞狀態不好和DNA含量較低的極限情況下，脂質體基因轉染試劑仍能使細胞表達一定量的熒光蛋白，說明其抗干擾能力和穩定性強。
保存條件
2-4℃保存，有效期一年，避免冷凍。
注意事項
1.質粒DNA轉染的優化：為達到最高的轉染效率和降低細胞毒性的影響，可以對DNA和轉染試劑的比例以及細胞密度進行優化，一般在1：0.5 ~ 1：5的范圍內優化DNA (µg) 和 Lip2000 (µl) 的比例。
2.通常DNA-轉染試劑復合物和細胞一起孵育6小時已經足夠產生較高的轉染效率。大多數細胞在本產品轉染后長達72小時未見明顯細胞毒性。但轉染后6小時更換新鮮培養基對于一些生長非常迅速的細胞有助于提高轉染效率；對于一些易于轉染的細胞如HEK293T細胞，換液可視細胞生長狀況而定，無需為提高轉染效率而換液。
3.使用高純度的DNA（A260/280比值越接近1.8越好）有助于獲得較高的轉染效率。
4.轉染前細胞需處于良好的生長狀態。
5.本產品在不同細胞上的轉染效率不同，轉染試劑的添加量需要摸索，具體請參考附表2和附表3。
6.本產品為無菌包裝，無需過濾，請注意無菌取用。
為了您的安全和健康，操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。
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